植物病害標本的采集制作與保存

論文類別:理學論文 > 農林學類論文
論文作者: 楊廣玲 張衛光 董會
上傳時間:2010/12/20 10:56:00

  摘要:植物病害標本是植物病理學實驗對病害癥狀最好的描述。因此,病害標本的采集、制作和保存是植物病理學科實驗教學中必不可少的基礎知識和技能。探討了不同類型的植物病害標本的采集、制作和保存技巧。
  關鍵詞:植物病害標本;采集;制作;保存
  
  植物病害標本是高等農業院校植物病理學科本科教學不可缺少的實物,它在教學中具有直觀、不受季節和區域限制的特點。因此,植物病害標本的采集、制作和保存是植物病理學科實驗教學中必不可少的基礎知識和技能。
  1植物病害標本的采集
  在北方由於季節分明,作物品種豐富,植物病害發生頻繁,大部分的植物病害標本都能從田間采集到。但是,病害的發生有一定的規律,要充分掌握病害發生的季節規律及寄主的生長規律才能收獲癥狀特征比較典型的標本。由於本科教學所用的標本大部分來源於學生的實習,因此大部分都是來源於大田采集。
  1.1病害標本采集的工具
  植物病害大多發生在根、莖、葉和果實上,因此所用工具要針對不同的部位,常用的工具有刀、剪、鋤、鋸等,還有標本夾、標本箱、標本紙、小玻瓶、紙袋、標簽和記錄本等[1]。
  1.2標本的采集
  大田采集主要分為按季節采集和按寄主采集。按季節采集主要是針對每年只在特定時期發生的病害。如白粉病具有性階段,小麥白粉病多在每年5—6月能夠采集到;植物的灰黴病則在低溫陰雨的條件下容易發病,每年3—5月最容易采到。按寄主采集主要針對寄主範圍廣泛的病害,如霜黴病,可以在很多植物病害的葉片上發現,常見的有萵苣、葡萄、白菜等;疫病如番茄、馬鈴薯、辣椒疫病等[2]。
  1.3采集標本的記錄
  為了區分采集的不同的標本,采集時要進行記載。主要包括寄主名稱、時間和地點、采集人姓名、主要發生情況和必要的生態環境因子。
  2植物病害標本的制作
  采集的標本通過鑒定以後,除去作為分離用的標本外,一般都用幹燥法或浸漬法進行保存,要求能夠盡量保存標本的本來性狀。一些微小的可以做成玻片標本,比較難以保存的和特殊的標本可通過多媒體掃描系統或顯微系統存入計算機中,制成相應的文體圖形、動畫、視頻圖像等[3]。
  2.1標本幹燥制作法
  2.1.1壓制法。采到的植物病害標本,若幹燥後容易卷縮的(如稻葉),最好隨采隨壓。其他的可以放到采集箱內帶回去後壓在吸水紙中,用標本夾夾緊,日曬任其幹燥。在此期間,要經常更換標本紙。夏季溫度和濕度較高,容易使標本發黴變色,標本紙要勤更換。通常前3~4 d換1~2次/d,以後2~3 d換1次,至標本完全幹燥。
  2.1.2燙幹法或矽膠烘幹法。不準備作為分離用的標本可以采用此2種方法。為了加快標本的幹燥速度,更好地保持標本原有的色澤,可以將剛采集的標本放在吸水紙或布中用電熨鬥來回迅速燙幹或將其加載草紙和幹燥過的矽膠粉的標本夾中捆緊,放入50 ℃烘箱中2~3 d,使其很快幹燥[4]。
  2.1.3微波爐幹燥保色法。為了彌補燙幹法的不足之處,劉春元等(2003)報道了根據植物病害標本的質地,摸索了一套微波幹燥保色法。此法幹燥迅速,保色效果較佳,可長期保存而不褪色。如豆科植物病葉處理1 min,效果最佳,癥狀保存完好[5]。
  2.1.4冷凍幹燥法。是目前比較好的方法。標本在冷凍的情況下幹燥,幾乎能完全保持原有的色澤和形狀。
  2.1.5自然幹燥法。水分很少的標本如枝幹病害的枝條等,不需要采取任何幹燥的手段,在空氣中自然幹燥即可。
  2.2浸漬標本制作法
  對於果實病害和汁液較多的病害以及肉質的子囊菌和擔子菌的子實體,均可以采用浸漬法保存。但此方法占的面積大,保存時間有限,只能用於保存少量的標本,這些標本大多用於教學和示範。浸漬標本的制作,需要配備各種類型的浸漬液,主要包括各種保持原本顏色的保存液和防腐的保存液。
  2.2.1保色浸漬液的配制。根據植物果實病害的寄主植物的顏色,可將保色的浸漬液分為保存綠色浸漬液、保存黃色和桔色的浸漬液、保存紅色的浸漬液等。①保存綠色的浸漬液。保存綠色的浸漬液很多,要根據不同的植物病害標本選擇適當的方法,才能達到好的效果。如醋酸銅浸漬液:將醋酸銅結晶逐漸加在50%的醋酸溶液中,到不再溶解為止,原液要根據標本顏色的不同將其用水稀釋3~4倍,然後使用。將標本加入到煮沸的稀釋液中,繼續加熱,標本的綠色開始褪去,經3~4 min,使綠色恢復後,將其取出,用清水沖凈,保存於5%的福爾馬林溶液中,或壓制成幹燥的標本。這種方法保色效果良好,但與原色稍有出入。不能煮的如淡綠色蘋果、梨、綠色葡萄等的病害標本可直接浸泡在1%亞硫酸100 mL、95%酒精100 mL、水800 mL配成的溶液中浸泡10~20 d,然後取出,沖洗幹凈,再保存在5%的福爾馬林溶液中[6]。另外,還有硫酸銅亞硫酸浸漬液、瓦查(Vacha)浸漬液等,也是保存綠色標本常用的方法。②保存紅色的浸漬液。對於紅色的果實病害標本如草莓、辣椒、馬鈴薯以及其他的植物紅色組織,選擇病害癥狀典型的標本,可以將標本浸入瓦查的紅色浸漬液(硝酸亞鈷15 g,福爾馬林25 mL,氯化錫10 g,水1 000 mL)內,2周後取出沖洗幹凈,浸泡在亞硫酸30~50 mL,福爾馬林10 mL,酒精(95%)10 mL,水1 000 mL配成的溶液中加以保存。③保存黃色和桔紅色標本的浸漬液。含葉黃素和胡蘿蔔素的果實如杏、梨、柿子、柑橘等,用亞硫酸溶液保存比較適宜。方法是將亞硫酸(含SO2 5%~6%)配成4%~10%的水溶液(含SO2 0.2%~0.5%)中[1]。總之,各種保色的浸漬液,除有些保存綠色的浸漬液外,保存其他顏色的浸漬液,效果都不理想。為了更好的顯示植物病害的危害狀,最好采用多媒體系統將其掃描或攝影,制作成相應的圖片和視頻進行保存[1]。
  2.2.2防腐浸漬液。對於浸漬標本的保存來說,防腐是最重要的一個環節。因此,需要防腐浸漬液對其進行保存。主要成分如下:福爾馬林50 mL,酒精(95%)300 mL,水2 000 mL,也可單用福爾馬林和酒精。
  3植物病害標本的保存
  3.1蠟葉標本的保存
  3.1.1散裝標本。將幹燥好的蠟葉標本放進消毒室或消毒箱內,傳統的方法是用酒精、升汞液消毒,或將敵敵畏或四氯化碳與二硫化碳混合液置於玻皿內,利用毒氣熏殺標本上的蟲或蟲卵,約3 d後即可取出。有條件也在-40 ℃低溫處理消毒。將消毒好的蠟葉標本鑒定、整理,然後裝進標本袋中,貼好標簽,以備實驗課用作實物標本,供學生上課使用。
  3.1.2制作盒裝標本。將植物病害癥狀典型的蠟葉標本和幹燥的果實標本,可利用玻面紙盒的方法進行保藏。按照標本的大小,選擇合適的紙盒(一般為長28 cm、寬20 cm、高1.5~3.0 cm),在紙盒中鋪1層棉花,棉花上放標本和標簽,註明寄主植物、寄生菌的名稱、采集時間等,然後加上玻蓋。棉花中可加入少量的樟腦粉或驅蟲的藥劑。這種方法制作的標本可長期保存,循環使用。
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  3.1.3塑封標本。適合保存葉片標本和較小的莖稈(如小麥、水稻)標本。做法是:根據植物病害標本的大小選擇適當的護卡膜,將1張比護卡膜稍小的白紙放入護卡膜中,在白紙右下角寫上該標本的標簽,然後把標本放在白紙上擺好,再把膜放平,放入預熱到160 ℃的過塑機封塑即可。如果標本較小、較窄,1張紙上可放幾個標本,可根據需要分類裝訂成冊[7]。這種方法做出的標本彌補了以上盒裝方法存在許多缺點,如標本盒體積大,攜帶不便,造價較高,只能用肉眼和手持放大鏡觀察標本的局部,對細小組織和結構觀察困難,標本易變色、發黴、受蟲蛀、不耐貯存等。
  3.2浸漬標本的保存
  將已鑒別的標本適當處理後放在盛有保存液的標本瓶中,用蠟或火棉膠封口後,將標簽貼在標本瓶上進行保存。由於浸漬液所使用的藥品大都為揮發性的,或容易氧化,因此浸漬標本最好放在暗處,以減少藥液的氧化,或瓶口因溫度變化而造成破裂。
  4註意事項
  植物病害標本的采集受植物生長季節、氣候條件、采集地點、采集時間及作物品種布局等多種因素的影響,要把握時機才能采到需要的癥狀典型的標本。另外,對於病害標本的制作,不同部位制作和保存的方法不同。蠟葉標本在保存過程中,要保持標本室的幹燥才能防止發黴,但幹燥標本易遭蟲蛀,因此最好每年用甲基溴等藥劑熏蒸,以保證標本的完好。浸漬標本保存液也要經常更換,以保證標本不腐爛。這樣,逐漸積累和補充各種病害標本,才能使實驗課程順利進行,達到預期的良好效果。
  5

參考文獻


  [1] 方中達.植病研究方法[M].北京:中國農業出版社,1996.
  [2] 黃艷花,覃連紅,梁萍,等.植病制片材料的準備與簡易保存技術研究[J].安徽農業科學,2008,36(11):4577-4578.
  [3] 劉春元,劉建華,邢小萍. 談植病實驗教學標本的建設和管理[J].實驗室科學,2006,4(2):121-122.
  [4] 陳尚義.植物標本保色新方法[J].教學儀器與實驗,2000,12(1):16.
  [5] 劉春元,劉建華.蠟葉病害標本微波爐幹燥保色法[J].植物保護,2003, 29(5):14.
  [6] 陳雷,盧家玖.果實標本的制作與保存[J].安徽林業科技,2006(3):49-50.
  [7] 袁波,莫怡琴.植物病蟲標本保存的新方法研究[J].安徽農業科學,2007,35(6):1717,1844.

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